"Ha Fe Adherent人羊膜細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ha Fe Adherent人羊膜細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
J 82細胞系相關產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞
UK Pan-1細胞系相關產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
Hs-611-T細胞系相關產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
RT-4細胞系相關產(chǎn)品:CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
Ha Fe Adherent人羊膜細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)相關培養(yǎng)基選購基本指南:如何選擇培養(yǎng)基:經(jīng)常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡單,問供應商就行了?;蛘哒业较嚓P的文獻,作為參考。培養(yǎng)基這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的,或者是專門針對某一種細胞的,如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎培養(yǎng)基, 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品:首先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商,針對自己所養(yǎng)的細胞,咨詢供應商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關于培養(yǎng)基品牌,目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品,也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用;MEM:成分簡單,貼壁細胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:適合細胞密度低,生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選,DNA轉染后轉化細胞的篩選培養(yǎng);RPM1640:應用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng),主要針對淋巴細胞,也適合其他細胞;199、109培養(yǎng)基:成分齊全,培養(yǎng)效果較好;F10培養(yǎng)基:適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng);F12培養(yǎng)基:適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng);McCoy’s5A培養(yǎng)基:特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。
BHK-21細胞系相關產(chǎn)品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
MILE SVEN1細胞系相關產(chǎn)品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品:SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
ECC 12細胞系相關產(chǎn)品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
H-1930細胞系相關產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
LSECs細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產(chǎn)品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
HD-LM-2細胞系相關產(chǎn)品:EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
MiaPaCa2細胞系相關產(chǎn)品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
LN382細胞系相關產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
Ha Fe Adherent人羊膜細胞系
OCI-LY-7細胞系相關產(chǎn)品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
P3X63Ag8653細胞系相關產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
HuH28細胞系相關產(chǎn)品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
CCC-HHM-2細胞系相關產(chǎn)品:CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
CHP-212細胞系相關產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
NK-92 MI細胞系相關產(chǎn)品:H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
SACCLM細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
GM00215細胞系相關產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
H-2126細胞系相關產(chǎn)品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
IMCD3細胞系相關產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
alpha TC1.6細胞系相關產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
MARC 145細胞系相關產(chǎn)品:CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
CHL-CL-11細胞系相關產(chǎn)品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
BJ1細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產(chǎn)品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
CAKI 2細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
NS20Y細胞系相關產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
NCI-HUT-596細胞系相關產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
KU-812-F細胞系相關產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
FTC-133細胞系相關產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
CAKI.1細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
PFSK細胞系相關產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
Jurkat-77細胞系相關產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
N-87細胞系相關產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
RPTEC TERT1細胞系相關產(chǎn)品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
MCAEC細胞系相關產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
D562細胞系相關產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
OCILY10細胞系相關產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產(chǎn)品:BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
MeT 5A細胞系相關產(chǎn)品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
HEMCSS細胞系相關產(chǎn)品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品:MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
CW-2細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
J-111細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品:MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
Ha Fe Adherent人羊膜細胞系
Hs832.Tc細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
J 774A.1細胞系相關產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
GA-10細胞系相關產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
H2052_MM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
H510細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產(chǎn)品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
SW 1116細胞系相關產(chǎn)品:WM239A細胞、NCIH209細胞、Fu97細胞
RPMI no 8226細胞系相關產(chǎn)品:NCIH82細胞、CHOS細胞、HEP-3B2細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產(chǎn)品:F36P細胞、C-4I細胞、PLA-802細胞
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