"MC-26 Adherent小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MC-26 Adherent小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn):無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時(shí),我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計(jì)時(shí),一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
MC-26 Adherent小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
【凍存細(xì)胞操作】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無(wú)菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時(shí)間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細(xì)胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時(shí)搖動(dòng),使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開(kāi)蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時(shí),仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
KLN205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
PC3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NWA細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
PLCPRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細(xì)胞、QBC939細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
MC-26 Adherent小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
MDCC-MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞
MDCC-MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞
CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL27細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞
NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
EFO-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-802細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞
MC-26 Adherent小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
HSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
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