"PG-LH7 Adherent人肺癌低轉(zhuǎn)移細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PG-LH7 Adherent人肺癌低轉(zhuǎn)移細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
PG-LH7 Adherent人肺癌低轉(zhuǎn)移細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞
Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
MCA-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
SUM102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞
PG-LH7 Adherent人肺癌低轉(zhuǎn)移細胞系
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
SW-962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
EB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
H-1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
HEK293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
PG-LH7 Adherent人肺癌低轉(zhuǎn)移細胞系
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
KG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細胞、KYSE450細胞、HEEpiC細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、PC3M-1E8細胞、Rabbit Kidney 13細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、FET細胞、CemT4細胞
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