"MADB106 Adherent大鼠乳腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MADB106 Adherent大鼠乳腺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液37℃下預熱;③超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內;⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉,以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
Vero細胞系相關產品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
H-524細胞系相關產品:SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
MDAMB134細胞系相關產品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關產品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
RS 4;11細胞系相關產品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
MADB106 Adherent大鼠乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
【凍存細胞操作】1)選對數增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數,使細胞密度達5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分,密度應達到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數量。
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關產品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
HHL-5細胞系相關產品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
NRK clone 49F細胞系相關產品:H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
JCA1細胞系相關產品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
FCCH1018細胞系相關產品:VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
SuDHL 10細胞系相關產品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
NIH 3T3細胞系相關產品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
GM2131細胞系相關產品:RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
SNU-475細胞系相關產品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
RPMI-1788細胞系相關產品:NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
H-2023細胞系相關產品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
MCFs細胞系相關產品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
MADB106 Adherent大鼠乳腺癌細胞系
NuTu-19細胞系相關產品:SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
LN 229細胞系相關產品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
HFL 1細胞系相關產品:MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
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HEY A8細胞系相關產品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產品:RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
AR42J細胞系相關產品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
PL9細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
P3JHR-1細胞系相關產品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
H-676B細胞系相關產品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
Simpson細胞系相關產品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
SKBr3細胞系相關產品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
Tu-177細胞系相關產品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
VERO C 1008細胞系相關產品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
HTR8svn細胞系相關產品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
WERI細胞系相關產品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
A7r5細胞系相關產品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
COR-L23細胞系相關產品:CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
NCIH2228細胞系相關產品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
SVEC 4-10細胞系相關產品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
NCI H69細胞系相關產品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
ssMCF-7細胞系相關產品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
Panc02-H0細胞系相關產品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
KYSE-450細胞系相關產品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
HOK細胞系相關產品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
Detroit562細胞系相關產品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
bEND.3細胞系相關產品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
Clone Y1細胞系相關產品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
Leukemia 1210細胞系相關產品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
HuLEC-5a細胞系相關產品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
MDAMB231細胞系相關產品:MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
SW-1783細胞系相關產品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
H2110細胞系相關產品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
Mel-RM細胞系相關產品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
GM17219細胞系相關產品:SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
SL-29細胞系相關產品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
SaOS-2細胞系相關產品:A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
PaTu 8988s細胞系相關產品:22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
OCM1A細胞系相關產品:686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
293-GP細胞系相關產品:SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
Hep 2細胞系相關產品:RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
HcerEpic細胞系相關產品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
MADB106 Adherent大鼠乳腺癌細胞系
HL1細胞系相關產品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
MAD109細胞系相關產品:Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
C41細胞系相關產品:HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
KMBC細胞系相關產品:MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關產品:D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
COV504細胞系相關產品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
NCI H929細胞系相關產品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
RMS13細胞系相關產品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
P3/ag細胞系相關產品:HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
WERI-Rb1細胞系相關產品:GCT細胞、L cells (TK-)細胞、B16/F0細胞
NH6細胞系相關產品:MonoMac6細胞、GM05384細胞、SUPB15細胞
NRK clone 49F細胞系相關產品:H322T細胞、NCIH1417細胞、H2347細胞
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