"Pt K1 Adherent袋鼠腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Pt K1 Adherent袋鼠腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
Pt K1 Adherent袋鼠腎細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)溫度:維持培養(yǎng)細胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡。培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細胞代謝與溫度成正比;人體細胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷,但仍有可能恢復;在40-41℃1小時,細胞會普遍受到損傷,僅小半數(shù)有可能恢復;41-42℃1小時,細胞受到嚴重損傷,大部分細胞死亡,個別細胞仍有恢復可能;當溫度在43℃以上1小時,細胞全部死亡。相反,溫度不低于0℃時,對細胞代謝雖有影響,但并無傷害作用;把細胞放入25-35℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數(shù)小時后,再回到37℃培養(yǎng),細胞仍能繼續(xù)生長。細胞代謝隨溫度降低而減慢。當溫度降至冰點以下時,細胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。但是,如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存。
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
Pt K1 Adherent袋鼠腎細胞系
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
DC2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
SUDHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
Pt K1 Adherent袋鼠腎細胞系
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
SUDHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
RPMI 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、ARPE-19細胞、A431/P細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML3細胞、NCIH524細胞、UMR106細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、LNCaP.FGC細胞
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