"751-NA-15 Adherent人神經瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
751-NA-15 Adherent人神經瘤細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
UACC 893細胞系相關產品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
PL-5細胞系相關產品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H146細胞系相關產品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
KYSE50細胞系相關產品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
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細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液;2)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內加入Hanks液少量,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
SKBr3細胞系相關產品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
DOK細胞系相關產品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
TN5B14細胞系相關產品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
alpha TC1.6細胞系相關產品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
SCL-2細胞系相關產品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
87 MG細胞系相關產品:Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
UMUC1細胞系相關產品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關產品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
CAL27細胞系相關產品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
MeT 5A細胞系相關產品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
HCC-1833細胞系相關產品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
BBE細胞系相關產品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
WM 239-A細胞系相關產品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
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SNU398細胞系相關產品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
AE 1201細胞系相關產品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
P388D1細胞系相關產品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
P388D1細胞系相關產品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
HFL1細胞系相關產品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
H2052_MM細胞系相關產品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
MDAMB175細胞系相關產品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
CHP 212細胞系相關產品:HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
D407 RPE細胞系相關產品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
M-O7e細胞系相關產品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
293細胞系相關產品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
H-661細胞系相關產品:PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
NCI-A549細胞系相關產品:M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
Wien 133細胞系相關產品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
HEK 293A細胞系相關產品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
aNK細胞系相關產品:OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
SUM-149PT細胞系相關產品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
PCI-4M細胞系相關產品:hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
NCI-H1668細胞系相關產品:NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞
SU.86.86細胞系相關產品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
Hs683T細胞系相關產品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
H23細胞系相關產品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
HCS-2/8細胞系相關產品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
COLO 824細胞系相關產品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
SCC-9細胞系相關產品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
KMS11細胞系相關產品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
C3A細胞系相關產品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
RH8994細胞系相關產品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
NCI H82細胞系相關產品:SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
NCIH1734細胞系相關產品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
CCK-81細胞系相關產品:H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
Vx2細胞系相關產品:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
32D clone 3細胞系相關產品:A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
RPMI 1846細胞系相關產品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
Eph4 1424細胞系相關產品:HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞
OV90細胞系相關產品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
H69/P細胞系相關產品:Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
MDA-MB 468細胞系相關產品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
SK-BR-3細胞系相關產品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
A-875細胞系相關產品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
HEK293-A細胞系相關產品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
751-NA-15 Adherent人神經瘤細胞系
LA795細胞系相關產品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
YAC-1細胞系相關產品:THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
H187細胞系相關產品:NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
no.11細胞系相關產品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
HCC2185細胞系相關產品:BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關產品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
NCIH1993細胞系相關產品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
H7721細胞系相關產品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
VMM5細胞系相關產品:NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
YD15細胞系相關產品:Hs940T細胞、Panc-08.13細胞、H-322細胞
H2081細胞系相關產品:hFOB細胞、NCI-SNU-520細胞、MM1-S細胞
TN5B14細胞系相關產品:MV4;11細胞、BL6細胞、293-EBNA1細胞
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