"DK-MG Adherent人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:膠質(zhì)母細胞瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DK-MG Adherent人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
細胞生長特性:貼壁
DK-MG Adherent人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?與CO2一起形成緩沖系統(tǒng),保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定;2)酸鈉的作用是什么?酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養(yǎng)基中的終濃度為1mM;3)加入HEPES有何好處?培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer,加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培養(yǎng)基中;4)紅的作用是什么?紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色;5)谷酰胺的作用是什么?幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后,可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中,使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
DK-MG Adherent人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
T-47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
DK-MG Adherent人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細胞、COLO-320細胞、Bovine Turbinate細胞
BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細胞、MDA-453細胞、NCI-H2196細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、A9細胞、NCI-H378細胞
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