"HAPI Adherent大鼠小膠質(zhì)細胞系
細胞背景資料:小膠質(zhì)細胞;自發(fā)永生;Wistar
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HAPI Adherent大鼠小膠質(zhì)細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
細胞生長特性:半貼壁
HAPI Adherent大鼠小膠質(zhì)細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
HAPI Adherent大鼠小膠質(zhì)細胞系
KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
HeLa S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
NCI-SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
NK-92.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
KTA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
AD-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
HAPI Adherent大鼠小膠質(zhì)細胞系
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、BE(2)M-17細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-2細胞、AtT-20細胞、INS1-E細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、LS-1034細胞、MC116細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細胞、NCM356細胞、HC11細胞
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