"M619 Adherent人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:脈絡膜黑色素瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
M619 Adherent人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流。【細胞傳代操作步驟】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
NCI-H1385細胞系相關產(chǎn)品:TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
TE671/RD細胞系相關產(chǎn)品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
Hs343T細胞系相關產(chǎn)品:Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-4-II-E細胞系相關產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
LN299細胞系相關產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
KS-SLK細胞系相關產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
細胞生長特性:貼壁
M619 Adherent人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
T2細胞系相關產(chǎn)品:HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
WEHI231細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
HCC-15細胞系相關產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
H1341細胞系相關產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
P31/Fujioka細胞系相關產(chǎn)品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
GM05372E細胞系相關產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
MES 23.5細胞系相關產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
HBE細胞系相關產(chǎn)品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
Jeko1細胞系相關產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
SCC-15細胞系相關產(chǎn)品:MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
LNT-229細胞系相關產(chǎn)品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
M619 Adherent人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞系
HUT 125細胞系相關產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
Granta-519細胞系相關產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
Granta-519細胞系相關產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
PGBE1細胞系相關產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
JEG-3細胞系相關產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
TOV112D細胞系相關產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
LCD細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
HCC1008細胞系相關產(chǎn)品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產(chǎn)品:WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
AMJ2-C8細胞系相關產(chǎn)品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
NCI-H2196細胞系相關產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
HTR-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
WIL2 S細胞系相關產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
MM-1S細胞系相關產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
H-647細胞系相關產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
JCA-1細胞系相關產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
SN12C細胞系相關產(chǎn)品:H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
BEL7404細胞系相關產(chǎn)品:Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
U-343MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
SPCA-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞
GM00637H細胞系相關產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品:HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
MMVECs細胞系相關產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
SW-1222細胞系相關產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
Wistar Institute-38細胞系相關產(chǎn)品:PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
AR-42J細胞系相關產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
GM04680細胞系相關產(chǎn)品:PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
DMS 114細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
NCI-128細胞系相關產(chǎn)品:SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
18G3.cl 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
H211細胞系相關產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
Mel-RM細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
SKNBE-2細胞系相關產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
DMS 153細胞系相關產(chǎn)品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
HT(H9)細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
M619 Adherent人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞系
TO175T細胞系相關產(chǎn)品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
H6c7細胞系相關產(chǎn)品:Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
RFL-6細胞系相關產(chǎn)品:SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
RPTC細胞系相關產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
SVEC4-10細胞系相關產(chǎn)品:Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
T 84細胞系相關產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
EM3細胞系相關產(chǎn)品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
Panc-10.05細胞系相關產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、MOLP-2細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
COLO-320細胞系相關產(chǎn)品:AML-12細胞、MRC-V細胞、RAT2細胞
HSC-4細胞系相關產(chǎn)品:RPMC細胞、HTSMC細胞、HPAF2細胞
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