"CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:軟骨肉瘤;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細(xì)胞生長不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點(diǎn)越用越堿,因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時(shí)候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,早早地終止消化。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候,37度消化過夜,細(xì)胞也沒事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對細(xì)胞的傷害也是很大的。
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細(xì)胞系
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞
H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細(xì)胞、SW579細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
NPA87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細(xì)胞、Y3細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
JROECL21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞
Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞
MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細(xì)胞系
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞
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