"CL1-5 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞背景資料:肺腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CL1-5 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
HuH28細胞系相關產(chǎn)品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
2B4-L細胞系相關產(chǎn)品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
RMC細胞系相關產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
VSC4.1細胞系相關產(chǎn)品:UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
GM04679細胞系相關產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
SUIT2細胞系相關產(chǎn)品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
細胞生長特性:貼壁
CL1-5 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
C2-C12細胞系相關產(chǎn)品:AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
NCIH460細胞系相關產(chǎn)品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞
MCA38細胞系相關產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
LS411細胞系相關產(chǎn)品:H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
COLO-824細胞系相關產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
YTMLC-90細胞系相關產(chǎn)品:ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
TOV21細胞系相關產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
PECAPJ34細胞系相關產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
KM12-SM細胞系相關產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
CL1-5 Adherent人肺腺癌細胞系
KYSE70細胞系相關產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
NTERA-2細胞系相關產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
LM8細胞系相關產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
LM8細胞系相關產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
NCl-H157細胞系相關產(chǎn)品:BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
WM266mel細胞系相關產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產(chǎn)品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
BT 549細胞系相關產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
ONS76細胞系相關產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HSC5細胞系相關產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
IB-RS-2細胞系相關產(chǎn)品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
CCD33Co細胞系相關產(chǎn)品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
A-172MG細胞系相關產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
MV-522細胞系相關產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
WM115-mel細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
NCI-H358細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
H1299細胞系相關產(chǎn)品:C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
16HBE14o-細胞系相關產(chǎn)品:Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
ACC2細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
MES-13細胞系相關產(chǎn)品:OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
PZ-HPV-7細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
SKMel-28細胞系相關產(chǎn)品:Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞
MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
OV1/P細胞系相關產(chǎn)品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
H-660細胞系相關產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
GM346細胞系相關產(chǎn)品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
GM346細胞系相關產(chǎn)品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
MG63細胞系相關產(chǎn)品:SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
SUNE 1細胞系相關產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
MSTO211H細胞系相關產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
FK81細胞系相關產(chǎn)品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
16-HBEo細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
MDA231細胞系相關產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
Fu97細胞系相關產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
CL1-5 Adherent人肺腺癌細胞系
DMS79細胞系相關產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
H-460細胞系相關產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
MLE 12細胞系相關產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
CA46細胞系相關產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
WML2細胞系相關產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
P388D1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
NSC-34細胞系相關產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
SVHUC細胞系相關產(chǎn)品:H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
OVCA420細胞系相關產(chǎn)品:H 9細胞、COLO-320DM細胞、H1435細胞
RKN細胞系相關產(chǎn)品:Tu177細胞、SNU-423細胞、CESS細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、BT-B細胞、JOSK-M細胞
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