"A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
細胞生長特性：貼壁
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：１)CO２培養(yǎng)箱：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；２)烘箱(干燥箱)：用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時，烘箱內(nèi)溫度一般要達到１６０℃以上，通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好，缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應(yīng)鼓風與升溫同時開始，至１００℃時，停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至１００℃以下后可開門。３)超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。４)液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。５)超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。６)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。７離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
Mel RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞
159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
SUM 149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
M3 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
G402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、3D4/21細胞、KYSE 270細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、RPE-hTERT細胞、LAD 2細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細胞、NS1-Ag 4/1細胞、22Rv1細胞
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