"KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料:食管鱗癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
細胞生長特性:貼壁
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決;2)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導,直到問題解決;3)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度;4)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細胞系
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
SUNE 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
MDA-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
BHK21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
P31/FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
LTEP-a-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細胞系
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
H-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH91細胞、KGN細胞、RD細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細胞、NGEC細胞、RPMI 1846細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、MM96L細胞、MDCK.2細胞
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