"HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細胞系
細胞背景資料:胰島β細胞;SV40轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
BT.549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
P116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
細胞生長特性:貼壁
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
A-704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細胞系
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
KTA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
LNCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細胞系
A-431細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
H-1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
CEMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
MOLP-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細胞、C8161細胞、697細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、COLO 206細胞、MBMEC細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細胞、H-1522細胞、Panc 5.04細胞
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