"EBC-1 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺鱗癌；皮膚轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來(lái)細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對(duì)細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)毒素含量過(guò)高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過(guò)夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細(xì)胞、SW-837細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞
NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
GA-10(Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
"