"Rh30 Adherent人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞背景資料:肺泡橫紋肌肉瘤;骨髓轉(zhuǎn)移
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Rh30 Adherent人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
細胞生長特性:貼壁
Rh30 Adherent人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
Rh30 Adherent人橫紋肌肉瘤細胞系
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
T-47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
BMSCs(mBMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
Hs 675.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
Rh30 Adherent人橫紋肌肉瘤細胞系
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
TM4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
PL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
MIN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC090細胞、UCW 100細胞、U-937細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、PECAPJ34細胞、33604細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、HCT116細胞、KU-19-19細胞
"