"ST2 Adherent小鼠骨髓基質細胞系
細胞背景資料：基質；BALB/c
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ST2 Adherent小鼠骨髓基質細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
COLO320/DM細胞系相關產品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
THP-1細胞系相關產品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
H128細胞系相關產品：Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Panc08.13細胞系相關產品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
Panc08.13細胞系相關產品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
PLB 985細胞系相關產品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
細胞生長特性：貼壁
ST2 Adherent小鼠骨髓基質細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
KBM5細胞系相關產品：KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞
NIH/3T3細胞系相關產品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
E6-1細胞系相關產品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
WEHI 3B細胞系相關產品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
CFPAC細胞系相關產品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
THLE-3細胞系相關產品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
MAEC細胞系相關產品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
JEG3細胞系相關產品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
RKO細胞系相關產品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞
SF 295細胞系相關產品：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關產品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
MH7A細胞系相關產品：HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
P31FUJ細胞系相關產品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
ST2 Adherent小鼠骨髓基質細胞系
BSC-1細胞系相關產品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
LAN-5細胞系相關產品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
HMO6細胞系相關產品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
HMO6細胞系相關產品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
CWR22Rv1細胞系相關產品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
OACP4 C細胞系相關產品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產品：HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關產品：T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
BC3 H1細胞系相關產品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
PC-9細胞系相關產品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
H-446細胞系相關產品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
RAMSCs細胞系相關產品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
MLOY4細胞系相關產品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
SL-1細胞系相關產品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
NCIH196細胞系相關產品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
Mono Mac 1細胞系相關產品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
MDAMB134細胞系相關產品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
OB2細胞系相關產品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
GM03190A細胞系相關產品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關產品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
NCIH650細胞系相關產品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
T-98細胞系相關產品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
SK-RC 52細胞系相關產品：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
2PK-3細胞系相關產品：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
CMT93細胞系相關產品：SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞
143B細胞系相關產品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
MOLT-16細胞系相關產品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
BAEC細胞系相關產品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
NCI-H211細胞系相關產品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
Rat1細胞系相關產品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
mRTEC細胞系相關產品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
HCC1187細胞系相關產品：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
Panc05.04細胞系相關產品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關產品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
LTEPsm細胞系相關產品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
LTEPsm細胞系相關產品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
159 PT細胞系相關產品：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
Lu99A細胞系相關產品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
NCIH460細胞系相關產品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
SUDHL1細胞系相關產品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
ST2 Adherent小鼠骨髓基質細胞系
AA-Mel細胞系相關產品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
YTMLC-90細胞系相關產品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
WPMY-1細胞系相關產品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
KU-19-19細胞系相關產品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
QGY7703細胞系相關產品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
10T1/2細胞系相關產品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
SKES1細胞系相關產品：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
OSC19細胞系相關產品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
HNE-2細胞系相關產品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
MM1.S細胞系相關產品：TKB1細胞、SK-LMS-1細胞、HT144-mel細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關產品：MHH-CALL2細胞、OV3121細胞、H-820細胞
E6-1細胞系相關產品：FRhK-4細胞、DMS153細胞、DF-1細胞
"