"RCS Adherent大鼠軟骨肉瘤細胞系
細胞背景資料:軟骨肉瘤;SD
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RCS Adherent大鼠軟骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
HEK/EBNA細胞系相關產(chǎn)品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
HCoEpiC細胞系相關產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
L-cells細胞系相關產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MOLM13細胞系相關產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NCI-H78細胞系相關產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
細胞生長特性:貼壁
RCS Adherent大鼠軟骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
MHCC 97細胞系相關產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
H2106細胞系相關產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
Hs819.T細胞系相關產(chǎn)品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
16-HBEo細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
AG 9細胞系相關產(chǎn)品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
NFS 60細胞系相關產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
SHEP1細胞系相關產(chǎn)品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
MOLP8細胞系相關產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
NPA 87細胞系相關產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
RCS Adherent大鼠軟骨肉瘤細胞系
NCI-H1703細胞系相關產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
C-6細胞系相關產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
KNS81細胞系相關產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
KNS81細胞系相關產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
MKN 28細胞系相關產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
SHG44細胞系相關產(chǎn)品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞
NCIH2135細胞系相關產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
MDA157細胞系相關產(chǎn)品:Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
NCI-H1915細胞系相關產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
NU-GC-4細胞系相關產(chǎn)品:TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
LM-TK-細胞系相關產(chǎn)品:RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
P3HR1細胞系相關產(chǎn)品:SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
hEEC細胞系相關產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
HCEC細胞系相關產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
NOK細胞系相關產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
hs 68細胞系相關產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
NCIH187細胞系相關產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
H22細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
NUGC-4細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞
LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
HEK293T/17細胞系相關產(chǎn)品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
Line 697細胞系相關產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
GM00637B細胞系相關產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
SF17細胞系相關產(chǎn)品:HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
VERO76細胞系相關產(chǎn)品:AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
EFM-192C細胞系相關產(chǎn)品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
NPC-TW039細胞系相關產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品:MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
JB-6細胞系相關產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
SUM-102細胞系相關產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
Keio University-19-19細胞系相關產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
HOS TE85細胞系相關產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品:HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
C-Li-7細胞系相關產(chǎn)品:SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
C-Li-7細胞系相關產(chǎn)品:SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
DMS-53細胞系相關產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
H9c2(2-1)細胞系相關產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
hUC-MSC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞
HMVEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
RCS Adherent大鼠軟骨肉瘤細胞系
CMT167細胞系相關產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關產(chǎn)品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
PNT-1A細胞系相關產(chǎn)品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
H748細胞系相關產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
HCC1954細胞系相關產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
MO59J細胞系相關產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
COLO-320HSR細胞系相關產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
PANC 327細胞系相關產(chǎn)品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
SK-CO-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1734細胞、H82sclc細胞、GB1細胞
TE-1細胞系相關產(chǎn)品:OC316細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、3T6-Swiss albino細胞
HS-766T細胞系相關產(chǎn)品:SW-1353細胞、KYSE-520細胞、MDA134細胞
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