"C-28/I2 Adherent人正常軟骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:軟骨;SV40轉(zhuǎn)化;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C-28/I2 Adherent人正常軟骨細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多,下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
JM-Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
C-28/I2 Adherent人正常軟骨細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
aTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407 RPE細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞、4T1細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞
TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
SMMC 7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
C-28/I2 Adherent人正常軟骨細(xì)胞系
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞
COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞
Bx-PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
C-28/I2 Adherent人正常軟骨細(xì)胞系
COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞
SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、SAS細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞
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