"DrG Adherent大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:背根神經(jīng)細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DrG Adherent大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1954細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
DrG Adherent大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
DrG Adherent大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞系
Kit-225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞
MDA-MB 468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
Hs895T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞
P3J HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
DrG Adherent大鼠背根神經(jīng)細(xì)胞系
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
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