"LA-N-1 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LA-N-1 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
細胞生長特性：貼壁
LA-N-1 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
LA-N-1 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
MDCC MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
LA-N-1 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
HEMCSS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、INS1細胞、NS1細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細胞、293-F細胞、Bat lung細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、RAW2647細胞、HONE1細胞
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