"GEO Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:結(jié)腸癌
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GEO Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞、HMEL細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
GEO Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
Hs-675-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞
NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞
GEO Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2122細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞
AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞
NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
SRS-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
GEO Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、F36P細(xì)胞、A-375細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
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