"LIM1215 Adherent人結直腸癌細胞系
細胞背景資料:結直腸癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LIM1215 Adherent人結直腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
UACC893細胞系相關產(chǎn)品:H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
Caov-4細胞系相關產(chǎn)品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE-10細胞系相關產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
CAL62細胞系相關產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
細胞生長特性:貼壁
LIM1215 Adherent人結直腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
GC-1細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
H766T細胞系相關產(chǎn)品:Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞
NL20細胞系相關產(chǎn)品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
BEL7404細胞系相關產(chǎn)品:Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
RPE1-hTERT細胞系相關產(chǎn)品:H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
ARO81細胞系相關產(chǎn)品:SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
Hs 695T細胞系相關產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
GP293細胞系相關產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
SuDHL 2細胞系相關產(chǎn)品:DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
Opossum Kidney細胞系相關產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
149 PT細胞系相關產(chǎn)品:Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
LIM1215 Adherent人結直腸癌細胞系
K299細胞系相關產(chǎn)品:CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
MNNG細胞系相關產(chǎn)品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
769-P細胞系相關產(chǎn)品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
UACC-812細胞系相關產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
TR-146細胞系相關產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
Sci-1細胞系相關產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
CAL-12T細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
WM-239-A細胞系相關產(chǎn)品:Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
HNEpC細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
H-9細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
MDA361細胞系相關產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
U-343MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
GM3569細胞系相關產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
IEC-6細胞系相關產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產(chǎn)品:STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
Hs 934.T細胞系相關產(chǎn)品:MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
JB 6細胞系相關產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
Hs 281.T細胞系相關產(chǎn)品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
CWR22R細胞系相關產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
GC-1spg細胞系相關產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
HCC1954-BL細胞系相關產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
Anglne細胞系相關產(chǎn)品:COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
OPM2細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
WSU-HN13細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
NCI-H660細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
2B4細胞系相關產(chǎn)品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
MEG-01細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品:PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
SUNE 1細胞系相關產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
NCIH820細胞系相關產(chǎn)品:HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
MRASMC細胞系相關產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
AD293細胞系相關產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
Hs 852.T細胞系相關產(chǎn)品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
LIM1215 Adherent人結直腸癌細胞系
KMY1022細胞系相關產(chǎn)品:OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
Ly18細胞系相關產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
NCI-H1693細胞系相關產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
MA-c細胞系相關產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
OCI AML4細胞系相關產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
HCC-1419細胞系相關產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產(chǎn)品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、HS 683T細胞、RH35細胞
Hs343T細胞系相關產(chǎn)品:Colon 26細胞、HeLa-S3細胞、NCI-H1668細胞
NL20細胞系相關產(chǎn)品:RIN m5F細胞、Colon 38細胞、COLO-829細胞
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