"CAL-39 Adherent人外陰鱗癌細胞系
細胞背景資料：外陰鱗癌細胞；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CAL-39 Adherent人外陰鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
細胞生長特性：貼壁
CAL-39 Adherent人外陰鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
RPMI 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
CAL-39 Adherent人外陰鱗癌細胞系
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞
AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
EST81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
DSL-6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
CAL-39 Adherent人外陰鱗癌細胞系
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、SW 900細胞、NCIH1781細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細胞、IM-9細胞、BeWo細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細胞、OVCA5細胞、Hepatoma-22細胞
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