"RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：２型腺病毒轉(zhuǎn)化；SD大鼠
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺做實(shí)驗(yàn)時，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
P30 OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
R.K.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系
MCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG5細(xì)胞、GES-1細(xì)胞、L132細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞
Jurkat E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞、HB 611細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、H735細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
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