"PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胰腺癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCIH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞
A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
32D:cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage OL細(xì)胞、LS174細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞
NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞
SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
SUDHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞
AGS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞、H-596細(xì)胞
MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞
SNU638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞、AD293細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
Y-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞
COLO-320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞
AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞
NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞
PaTu 8988s Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、U-251細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、TE9細(xì)胞
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