"LAD 2 Adherent人肥大細胞系
細胞背景資料:肥大細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LAD 2 Adherent人肥大細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
細胞生長特性:懸浮
LAD 2 Adherent人肥大細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
LAD 2 Adherent人肥大細胞系
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
143TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
T-47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
OAW 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
LAD 2 Adherent人肥大細胞系
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、DR2R 1610細胞、hs 68細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、SCC-4細胞、OCM1細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、MDA-415細胞、Hs695T細胞
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