"OV3121 epithelioid cells小鼠卵巢顆粒細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
HARA-B細胞系相關產品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關產品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
RCC 786-O細胞系相關產品：IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
細胞生長：貼壁
OV3121 epithelioid cells小鼠卵巢顆粒細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MRCV細胞系相關產品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
SkMel31細胞系相關產品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
MDA-MB-231細胞系相關產品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OV3121 epithelioid cells小鼠卵巢顆粒細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
HEC1A細胞系相關產品：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
ETCC007細胞系相關產品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
PIEC細胞系相關產品：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
Ramos (RA)細胞系相關產品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
UMUC3細胞系相關產品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
SU-DHL-6細胞系相關產品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
A-9細胞系相關產品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
MMAc.SF細胞系相關產品：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
COLO824細胞系相關產品：U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
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Strain KB細胞系相關產品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
Hs 934.T細胞系相關產品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
OCI-Ly 10細胞系相關產品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
HCC1187細胞系相關產品：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
NCI-SNU-398細胞系相關產品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
LC1/Sq細胞系相關產品：Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
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H2170細胞系相關產品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
IMCD3細胞系相關產品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
143B細胞系相關產品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
RPMI8226/S細胞系相關產品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
HT-1197細胞系相關產品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
NCIH508細胞系相關產品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
B16-F10細胞系相關產品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
TE 85.T細胞系相關產品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
GTL-16細胞系相關產品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
HCT-15細胞系相關產品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
GM03190A細胞系相關產品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
MDCKII-WT細胞系相關產品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
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SK MEL 5細胞系相關產品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
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PC 12細胞系相關產品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
293 H細胞系相關產品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
SW 579細胞系相關產品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
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NSH細胞系相關產品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
HLEC細胞系相關產品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
H-2405細胞系相關產品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
HPAC細胞系相關產品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
WM 239-A細胞系相關產品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
SKNBE2C細胞系相關產品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
OV 1063細胞系相關產品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
HNE1細胞系相關產品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
OV3121 epithelioid cells小鼠卵巢顆粒細胞系
HUT-125細胞系相關產品：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
RPMI8226細胞系相關產品：TERT-RPE1細胞、Fu97細胞、hTERT RPE1細胞
PL-11細胞系相關產品：PA1細胞、YH-13細胞、A549細胞
ETCC007細胞系相關產品：VP303細胞、NCI-H1836細胞、B-CPAP細胞
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