"RAG Adherent小鼠腎腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎癌；BALB/c
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RAG Adherent小鼠腎腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Earles's cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
RAG Adherent小鼠腎腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
Pt-K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞、HKF細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞
hESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞
RAG Adherent小鼠腎腺癌細(xì)胞系
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞
Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
D 407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
SKOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞
BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
RAG Adherent小鼠腎腺癌細(xì)胞系
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
SF 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、H847細(xì)胞
MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
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