"C127 Adherent小鼠乳腺腫瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C127 Adherent小鼠乳腺腫瘤細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
KLM-1細胞系相關產品:RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
Hs-688A-T細胞系相關產品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
H1838細胞系相關產品:DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IHH-4細胞系相關產品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
B16-F1細胞系相關產品:Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
MSC細胞系相關產品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
C127 Adherent小鼠乳腺腫瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
3396細胞系相關產品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
MuM-2C細胞系相關產品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
FT-293細胞系相關產品:B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
DR2R 1610細胞系相關產品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
COLO-699細胞系相關產品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
NOZ細胞系相關產品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
Panc 3.27細胞系相關產品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
COLO-829細胞系相關產品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
RM1細胞系相關產品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
NCI H157細胞系相關產品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
RWPE1細胞系相關產品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
HIT-T15細胞系相關產品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
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MBVP細胞系相關產品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
Lewis-Lung細胞系相關產品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
MeT5A細胞系相關產品:OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
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Helacyton gartleri細胞系相關產品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
SK MES 1細胞系相關產品:OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關產品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
MS1細胞系相關產品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
GM04154B細胞系相關產品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
KM933細胞系相關產品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
WEHI-164細胞系相關產品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
CA-46細胞系相關產品:B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
MIN6細胞系相關產品:NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
266 Bl細胞系相關產品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
HCC1833細胞系相關產品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
Dakiki細胞系相關產品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
T HEECs細胞系相關產品:N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
Mink Lung細胞系相關產品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關產品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
Molm14細胞系相關產品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
NCIH2452細胞系相關產品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
U138-MG細胞系相關產品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
NBL-7細胞系相關產品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
H1048細胞系相關產品:IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
ONS-76細胞系相關產品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關產品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
T241細胞系相關產品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
HOEC細胞系相關產品:HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
GT38細胞系相關產品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
OS-732細胞系相關產品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
TE671/RD細胞系相關產品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
KE-39細胞系相關產品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
MDA-MB 361細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
HNSC細胞系相關產品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
HNSC細胞系相關產品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
NCI-H1876細胞系相關產品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
FHC細胞系相關產品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
NCI-H28細胞系相關產品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
C127 Adherent小鼠乳腺腫瘤細胞系
LS-411N細胞系相關產品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
HSC-6細胞系相關產品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
BT549細胞系相關產品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
MyLa2059細胞系相關產品:SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
IGROV 1細胞系相關產品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
BCPAP細胞系相關產品:NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
J-774A.1細胞系相關產品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
H-1882細胞系相關產品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
Ly3細胞系相關產品:NCI-H295R細胞、MAVER1細胞、HA細胞
RC-4B/C細胞系相關產品:SW-948細胞、KP-4細胞、HFF-1細胞
FT-293細胞系相關產品:B104 [Rat neuroblastoma]細胞、VSC4.1細胞、PANC3.27細胞
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