"UMR-106 Adherent大鼠骨肉瘤細胞系
細胞背景資料:注射放射性同位素磷(32P)誘導(dǎo)產(chǎn)生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立了UMR-106細胞株。 細胞對PTH,前列腺素及破骨甾體有響應(yīng)。 對PTH的響應(yīng)度,UMR-106比相關(guān)細胞株UMR-108(ATCC CRL-1663)要高。 蛋白激酶C的活化抑制ATP誘導(dǎo)的胞內(nèi)水平的升高。 起始骨肉瘤和克隆株都是University of Sheffield的T.J. Martin建立的。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
UMR-106 Adherent大鼠骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
細胞生長特性:貼壁
UMR-106 Adherent大鼠骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
THP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
UMR-106 Adherent大鼠骨肉瘤細胞系
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
THP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
Renal Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
Granta 519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Hs-343-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
SNU739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
UMR-106 Adherent大鼠骨肉瘤細胞系
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、D341MD細胞、SK-Mel 1細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、HCC0015細胞、HMEC-1細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細胞、CemT4細胞、FLC-7細胞
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