"MKN45 Adherent人胃癌細胞系
細胞背景資料:該細胞系由S Akiyama建立,源于一位35歲患有印戒細胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MKN45 Adherent人胃癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
細胞生長特性:貼壁+懸浮
MKN45 Adherent人胃癌細胞系
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
OCI-Ly07細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
MKN45 Adherent人胃癌細胞系
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
RPMI-8226S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
MeT5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
MKN45 Adherent人胃癌細胞系
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細胞、RCK8細胞、SK-Hep1細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、RKO_AS45細胞、SK RC 20細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、PA1細胞、HEK-2細胞
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