"HT-3 Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HT-3 Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HT-3 Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
HT-3 Adherent人子宮頸癌細胞系
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
IHH4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
IPAM-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
SK Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
451-LU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
HT-3 Adherent人子宮頸癌細胞系
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
HEMCSS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、NCI-H102細胞、SW954細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細胞、343 MG細胞、GM637細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細胞、H1975細胞、U373細胞
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