"SV-HUC-1 Adherent人膀胱上皮永生化細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SV-HUC-1 Adherent人膀胱上皮永生化細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
SV-HUC-1 Adherent人膀胱上皮永生化細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
LICR-HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞
H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細(xì)胞、SW579細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞
CCD19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞
PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
SV-HUC-1 Adherent人膀胱上皮永生化細(xì)胞系
NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞
TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
H-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U937細(xì)胞、MV4II細(xì)胞、P388細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
Anglne細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
H766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞
293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞
T-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細(xì)胞、HcaF細(xì)胞、GM01232細(xì)胞
HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞
SV-HUC-1 Adherent人膀胱上皮永生化細(xì)胞系
NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM134細(xì)胞、S91細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
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