"ID8 Adherent小鼠卵巢癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
GM05372E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
細胞生長特性：貼壁生長
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
BT483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細胞系
SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
UMUC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞
NCI-H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
DSL-6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細胞系
H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細胞、MPP89細胞、KMB-17細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細胞、KYSE-180細胞、SH-SY5Y細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、NF639細胞、CCK-81細胞
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