"ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
LS-1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
Hs343T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
SUSM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
A375-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、JM1細胞、BNL-HCC細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細胞、MDA MB 453細胞、SKMES細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細胞、H-1793細胞、PC3M-2B4細胞
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