"NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
SNU5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周換液１-２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
NW-MEL-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
B16/F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細胞系
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
KATO III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
RGCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
SK Col 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
NCIH1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
NIT-1 Adherent小鼠胰腺β細胞系
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細胞、293E細胞、H-23細胞
CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細胞、Hs294T細胞、OCI-LY-19細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、CL11細胞、HPF細胞
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