"NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用，近年來細胞學蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜，需要的實驗設備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡，血清中內毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉放-２０℃ １ hour，再轉入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉移到液氮內(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
HCC1419細胞系相關產品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
hTERTHME1細胞系相關產品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
SUPM2細胞系相關產品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
MRCV細胞系相關產品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
細胞生長特性：貼壁生長
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
IBMF-7細胞系相關產品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
NCI-H1819細胞系相關產品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
H-727細胞系相關產品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
AN3CA細胞系相關產品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
JVM2細胞系相關產品：YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
293-EBNA細胞系相關產品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SUDHL-4細胞系相關產品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
PL 45細胞系相關產品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
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HEEpiC細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
SKMEL3細胞系相關產品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
R 2 C細胞系相關產品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
G292細胞系相關產品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
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CHL1細胞系相關產品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
RMC-1細胞系相關產品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
KFB細胞系相關產品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
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OCI-LY-8細胞系相關產品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
HEK293-A細胞系相關產品：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
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L-M(TK-)細胞系相關產品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
COLO-680N細胞系相關產品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關產品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
OUMS-27細胞系相關產品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
TEV-1細胞系相關產品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
IMR32細胞系相關產品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
NCI-HUT-460細胞系相關產品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
HeLa 229細胞系相關產品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
A 253細胞系相關產品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
SNU-869細胞系相關產品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
BrCL18細胞系相關產品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
SNU-475細胞系相關產品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
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Vero E6細胞系相關產品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
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Huh-7細胞系相關產品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
U251細胞系相關產品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
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GES1細胞系相關產品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
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U373 MG細胞系相關產品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
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Epstein-Barr-3細胞系相關產品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
H1688細胞系相關產品：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
GM00346B細胞系相關產品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
TGBC11T細胞系相關產品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
NCI-H810細胞系相關產品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
COLO-829細胞系相關產品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
NU-GC-2細胞系相關產品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
A-375細胞系相關產品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產品：SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
LC-1細胞系相關產品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
293-H細胞系相關產品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
E.G7-OVA細胞系相關產品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
N-87細胞系相關產品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
P815細胞系相關產品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
H-2172細胞系相關產品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
BSC-1細胞系相關產品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
KYSE-30細胞系相關產品：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
B16-F10細胞系相關產品：Sp2/mIL-6細胞、UPCISCC090細胞、Calu-1細胞
H727細胞系相關產品：OCM-1細胞、UCH-1細胞、SN4741細胞
H719細胞系相關產品：CAL-78細胞、OKT 3細胞、NIH:OVCAR-10細胞
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