"HuO9 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HuO9 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
HuO9 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
KYSE-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
HuO9 Adherent人骨肉瘤細胞系
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
SCC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
CCRF-SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
SK.MEL.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
HMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
HuO9 Adherent人骨肉瘤細胞系
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
A-72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細胞、C12細胞、P19細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、LMTK-細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、H1395細胞
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