"Hepa 1-6 Adherent小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：此細胞株源自C５７/L小鼠中引發(fā)的BW７７５６肝癌；表達AFP、α１抗胰蛋白酶、淀粉酶；鼠痘病毒陰性。此細胞可以在無血清的培養(yǎng)基中繁殖，培養(yǎng)基成分是：DMEM,７５%;Waymouth＇sMAB８７/３培養(yǎng)基，２５%。添加３x１０-８M。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Hepa 1-6 Adherent小鼠肝癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
TJ905細胞系相關產品：CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
OVCAR.5細胞系相關產品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
HSKMC細胞系相關產品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA 435細胞系相關產品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
NT2/D1細胞系相關產品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
Ha Fe細胞系相關產品：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
細胞生長特性：貼壁生長
Hepa 1-6 Adherent小鼠肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
OCM-1A細胞系相關產品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
B 95.8細胞系相關產品：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
ZR-75-30細胞系相關產品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
IFRS1細胞系相關產品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
B16-F10-BL6細胞系相關產品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
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BALB 3T3 clone A31細胞系相關產品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
P3X63Ag8653細胞系相關產品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
IGR-OV1細胞系相關產品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
SK-MEL-24細胞系相關產品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
SF 126細胞系相關產品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
Evsa-T細胞系相關產品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
J82COT細胞系相關產品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
Hepa 1-6 Adherent小鼠肝癌細胞系
PLC/PRF5細胞系相關產品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
TSUpr1細胞系相關產品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
FL83B細胞系相關產品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
FL83B細胞系相關產品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
WSU-DLCL2細胞系相關產品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產品：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
OUMS23細胞系相關產品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
H35 Reuber細胞系相關產品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
WRL68細胞系相關產品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
PK-15細胞系相關產品：PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞
COLO 738細胞系相關產品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
MOLT 16細胞系相關產品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關產品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
DC2.4細胞系相關產品：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
Caco-2細胞系相關產品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
J.E6-1細胞系相關產品：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
TT細胞系相關產品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
HuH-1細胞系相關產品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關產品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
Co-115細胞系相關產品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
NRK clone 49F細胞系相關產品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關產品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
Hepa-RG細胞系相關產品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
DI TNC-1細胞系相關產品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
HREC細胞系相關產品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
hA549細胞系相關產品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
CF Pac1細胞系相關產品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
MC9細胞系相關產品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
PTK 1細胞系相關產品：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
BN-CL2細胞系相關產品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
CF Pac1細胞系相關產品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
PC 61.5.3細胞系相關產品：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
NCI-H211細胞系相關產品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
CAL33細胞系相關產品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
P36細胞系相關產品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
P36細胞系相關產品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
293-GP細胞系相關產品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
SiHa細胞系相關產品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
AGS細胞系相關產品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
Hepa 1-6 Adherent小鼠肝癌細胞系
U-2 OS細胞系相關產品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
SK_HEP1細胞系相關產品：WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
RD-ES細胞系相關產品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
NL20細胞系相關產品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
JM1細胞系相關產品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
HCV29細胞系相關產品：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
MLA144細胞系相關產品：HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
SNGM細胞系相關產品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
Hx147細胞系相關產品：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
Hs683細胞系相關產品：293-F細胞、A375SM細胞、LuCL4細胞
OCI AML3細胞系相關產品：SW 839細胞、MC9細胞、MDAMB134VI細胞
ZR-75-30細胞系相關產品：EBC-1/original細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、L-5178-Y-R細胞
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