"HCC95 Adherent人肺鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HCC95 Adherent人肺鱗狀細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
C-4 I細胞系相關產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
SUM-159-PT細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
VP229細胞系相關產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EC-9706細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
HCC95 Adherent人肺鱗狀細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
HEH2細胞系相關產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品:Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
RMC細胞系相關產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
CEM.C1細胞系相關產(chǎn)品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
U-hth74細胞系相關產(chǎn)品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
SCLC-21H細胞系相關產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
Gerner 7666細胞系相關產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
SPDC-CCL141細胞系相關產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
SKBr3細胞系相關產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
MDA MB 436細胞系相關產(chǎn)品:U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
SF-295細胞系相關產(chǎn)品:HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
HCC95 Adherent人肺鱗狀細胞癌細胞系
Scott細胞系相關產(chǎn)品:GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品:CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
Bat lung細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
H7721細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
T-ALL-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
S3 HeLa細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
YH細胞系相關產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
BAR-T細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
SW 1417細胞系相關產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
NCIH146細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
SW 48細胞系相關產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
CCD-1112sk細胞系相關產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
SF-763細胞系相關產(chǎn)品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
ATN1細胞系相關產(chǎn)品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
RMS1598細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
293EBNA細胞系相關產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
GM00346細胞系相關產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
HCT-FET細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
Caki2細胞系相關產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
CX1細胞系相關產(chǎn)品:RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞
GM17346細胞系相關產(chǎn)品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
UACC812細胞系相關產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
JKT-1細胞系相關產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
COLO320-DM細胞系相關產(chǎn)品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
PANC-08-13細胞系相關產(chǎn)品:SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
MLA144細胞系相關產(chǎn)品:HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
PK-15細胞系相關產(chǎn)品:PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞
MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
NCI-HUT-596細胞系相關產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
293FT細胞系相關產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
HFF細胞系相關產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
HDQ-P1細胞系相關產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
HCC95 Adherent人肺鱗狀細胞癌細胞系
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
RSC96細胞系相關產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
HLEB3細胞系相關產(chǎn)品:McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
MT2細胞系相關產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
KY180細胞系相關產(chǎn)品:SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
293H細胞系相關產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
NCI-H-69細胞系相關產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
SW-900細胞系相關產(chǎn)品:HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
U266 Bl細胞系相關產(chǎn)品:H1651細胞、Hmy.2 CIR細胞、JS1細胞
MC9細胞系相關產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、LTEP-a2細胞、GC-1spg細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品:Hep II細胞、McG-1細胞、UCLA NPA871細胞
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