"SW954 Adherent人陰戶鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SW954 Adherent人陰戶鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞
OCI-AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-94細(xì)胞、F36P細(xì)胞、Colo320細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
SW954 Adherent人陰戶鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
RH-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞
SW954 Adherent人陰戶鱗癌細(xì)胞系
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞
MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
KHYG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞
ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
SW954 Adherent人陰戶鱗癌細(xì)胞系
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細(xì)胞、TE85細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
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