"COLO 829 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見(jiàn)的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
JM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
AdHek細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞
P3-x63-Ag8 653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞、MV3細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
AdHek細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞
OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
SW-1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
32D-Cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FT-293細(xì)胞、Co 115細(xì)胞、H1581細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
MLE 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、HuT78細(xì)胞
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
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