"LK-2 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
LK-2 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽(tīng)說(shuō),應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近300株細(xì)胞里面,還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
LK-2 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題,究竟是什么原因?qū)е?,我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決?以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng);3)對(duì)冷凍液過(guò)敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
LK-2 Adherent人肺癌細(xì)胞系
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
HuNS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
OCI-Ly03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞
NCIH2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞
MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
LK-2 Adherent人肺癌細(xì)胞系
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
NCTC 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDrTC細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
MS 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
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