"NPA epithelioid cells人甲狀腺乳頭狀癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
DHL8細胞系相關產(chǎn)品:Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
細胞生長:貼壁
NPA epithelioid cells人甲狀腺乳頭狀癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品:HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
EAHY-926細胞系相關產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NPA epithelioid cells人甲狀腺乳頭狀癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
Panc 02.03細胞系相關產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
EC9706細胞系相關產(chǎn)品:EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
MARC-145細胞系相關產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
LN299細胞系相關產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
BEL/FU細胞系相關產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
KYSE 140細胞系相關產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
LLC-PK(1)細胞系相關產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
Mono Mac 6細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
NPA epithelioid cells人甲狀腺乳頭狀癌細胞系
Ect1/E6E7細胞系相關產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
HSC2細胞系相關產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
H22-H8D8細胞系相關產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品:MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
FT-293細胞系相關產(chǎn)品:B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
DI TNC-1細胞系相關產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
SK-MEL-3細胞系相關產(chǎn)品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
L6565細胞系相關產(chǎn)品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
MUVEC細胞系相關產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
BC3H1細胞系相關產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
NR-8383細胞系相關產(chǎn)品:SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
Caco-2細胞系相關產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
H-2135細胞系相關產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
NCI-H650細胞系相關產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
HUC細胞系相關產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
3T3-A31細胞系相關產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
GM-3573細胞系相關產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
H2444細胞系相關產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
MPVECs細胞系相關產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
HSC/mHSC細胞系相關產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
G422細胞系相關產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
KMS-26細胞系相關產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
149PT細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
FO [Mouse myeloma]細胞系相關產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
Hs 888.Lu細胞系相關產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
EB-3細胞系相關產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
HPDEC細胞系相關產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
OCI-AML-4細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
P3HRI細胞系相關產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品:HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
BE(2)M-17細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
U 266細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
PL-45細胞系相關產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
MDCK2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
NPA epithelioid cells人甲狀腺乳頭狀癌細胞系
TR 146細胞系相關產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
K562/ADR細胞系相關產(chǎn)品:LCMS細胞、SACC-LM細胞、MSTO211H細胞
EB2細胞系相關產(chǎn)品:CX1細胞、Tca-83細胞、SKN-SH細胞
EC9706細胞系相關產(chǎn)品:EA hy 926細胞、SP2/0 Ag-14細胞、MIO-M1細胞
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