"NCI-H2066 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H2066 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)簡(jiǎn)介：干粉培養(yǎng)基：以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過(guò)程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過(guò)濾，過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會(huì)減少，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的，批間差會(huì)很小。大家是不是感覺(jué)液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認(rèn)同了；無(wú)血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子。無(wú)血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長(zhǎng)因子、必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來(lái)的不利因素，使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過(guò)渡到無(wú)血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方，對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí)，也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用，因此對(duì)試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價(jià)格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
MDA-MB-134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML3細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：每周換液２-３次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
NCI-H2066 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：聚團(tuán)懸浮
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
C-33 A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞
IA-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-19Lu細(xì)胞、H2009細(xì)胞、H-220細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
NCI-H2066 Adherent人肺癌細(xì)胞系
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞
PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
NCIH2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
NCI-H2066 Adherent人肺癌細(xì)胞系
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
alpha-TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 522細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞、Leydig細(xì)胞
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
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