"SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
TE-8細胞系相關產品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
HEK (AD293)細胞系相關產品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
H1395細胞系相關產品：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
MOLM13細胞系相關產品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
SCC 9細胞系相關產品：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
細胞生長特性：懸浮生長，少量貼壁
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
Panc_04_03細胞系相關產品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
GC9811-P細胞系相關產品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
RGB細胞系相關產品：RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
L5178Y細胞系相關產品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
UM-UC-14細胞系相關產品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
HO-8910 PM細胞系相關產品：CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
UCLA SO M21細胞系相關產品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
LNT-229細胞系相關產品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
CMT-93細胞系相關產品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
ECC 12細胞系相關產品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
SKOV3細胞系相關產品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
CAOV4細胞系相關產品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
MDA-MB-436細胞系相關產品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
CORL23細胞系相關產品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
RA 1細胞系相關產品：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
32D.cl3細胞系相關產品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
RCM1細胞系相關產品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
BCaP 37細胞系相關產品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關產品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
NCI H716細胞系相關產品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
BHP-10細胞系相關產品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
NCI-H647細胞系相關產品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
H498細胞系相關產品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
C17.2細胞系相關產品：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
H1573細胞系相關產品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
MDA-MB-435細胞系相關產品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
H-441細胞系相關產品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
H2170細胞系相關產品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
NCIH1792細胞系相關產品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
Walker 256細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
NBL-4細胞系相關產品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
RCK-8細胞系相關產品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
C2BBe1細胞系相關產品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
HOPC細胞系相關產品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
U251-MG細胞系相關產品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
C41細胞系相關產品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
NCI-H889細胞系相關產品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
FRhK-4細胞系相關產品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
RFL 6細胞系相關產品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
EFM-19細胞系相關產品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
NCIH1650細胞系相關產品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
RKN細胞系相關產品：Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞
NSH細胞系相關產品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
RBMEC細胞系相關產品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
HEC151細胞系相關產品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
CCD841CoN細胞系相關產品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
BEND細胞系相關產品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
ST 486細胞系相關產品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
ST 486細胞系相關產品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
639-V細胞系相關產品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
OKT 3細胞系相關產品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
OCIAML5細胞系相關產品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
SNU449細胞系相關產品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
MV 4;11細胞系相關產品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
HCC1171細胞系相關產品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
UACC893細胞系相關產品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產品：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
GM03569D細胞系相關產品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
EBC-1/original細胞系相關產品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
CCRF/CEM細胞系相關產品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
RCC-10RGB細胞系相關產品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
C41細胞系相關產品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
PK15細胞系相關產品：WM 2664細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、CAL33細胞
HRCEC細胞系相關產品：Calu3細胞、CTLL(2)細胞、MHCC97H細胞
RGB細胞系相關產品：RL細胞、SK HEP 01細胞、NU-GC-4細胞
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