"ECV-304 epithelioid cells人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
ECV-304 epithelioid cells人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ECV-304 epithelioid cells人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞
ECV-304 epithelioid cells人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
NCI-H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
ARH 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
J82 COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
ECV-304 epithelioid cells人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA205細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、GM06141細(xì)胞
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