"BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞
KP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞
CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞
NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
Mel-624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
L M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT-7細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞、58F細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
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