"NCI-H2342 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實驗,細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2342 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:6傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
NCI-H2342 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細(xì)胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細(xì)胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細(xì)胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進(jìn)行培養(yǎng)。
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
NCI-H2342 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞
KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
A2780-CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
Hs 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM1900細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、769P細(xì)胞
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
NCI-H2342 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY-1細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、H1930細(xì)胞
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